技术介绍：

流感是人类历史上最严重的传染病之一，抗击流感最有效的手段就是接种流感疫苗。传统的流感疫苗采用鸡胚生产，但存在一些难以克服的缺点：过程繁琐；需要大量的SPF鸡胚，这在流感大流行时难以保证供应；在表面抗原上容易发生突变，可能造成疫苗抗原性改变；含有卵清蛋白致敏原等。哺乳动物细胞生产流感疫苗可以很好的克服以上问题，这也是改进流感疫苗生产现状的重要发展方向。目前在临床实验上用于流感疫苗生产研究的细胞系主要有MDCK、Vero、PER.C6等，但产量仍有待提高，其中一个解决办法就是寻找更加适合在哺乳动物细胞系中复制的流感病毒株。目前流感疫苗的通用骨架株是PR8毒株(A/PuertoRico/8/1934)，它是鸡胚适应株，在鸡胚中复制效率很高，但PR8并不适合在哺乳动物细胞中扩增。中科院上海巴斯德研究所的孙兵老师课题组在PR8毒株的基础上，通过随机突变获得了一株具有哺乳动物细胞适应性的甲型流感病毒疫苗株PR8-4mut，该毒株病毒蛋白上的四个氨基酸突变位点贡献了其在哺乳动物细胞中的适应性。用该适应株感染Vero细胞，24h后病毒滴度就达到了107.5PFU/ml，48h后病毒滴度达到峰值约108PFU/ml；然而PR8感染Vero细胞，24h后病毒滴度只有104.5PFU/ml，48h后病毒滴度达到的峰值也仅约106.5PFU/ml（图1）。适应株PR8-4mut不仅没有改变病毒的抗原性，也没有提高病毒对鸡胚和小鼠的致病力。以该适应株PR8-4mut重组得到的禽流感病毒（H7N1、H9N2）疫苗株能在Vero和MDCK细胞中更快速地生长（图2）。因而本高产骨架株PR8-4mut能够显著地提高哺乳动物细胞中甲型流感疫苗的产量。

竞争优势：

1.本适应株PR8-4mut适用于Vero和MDCK细胞系。

2.本适应株PR8-4mut感染哺乳动物细胞仅48h后病毒滴度达到峰值约108PFU/ml。

3.本适应株PR8-4mut不仅没有改变病毒的抗原性，也没有提高病毒对鸡胚和小鼠的致病力。

专利状态：

已递交了一项中国专利申请。

Ref.No.:IPS12-005

附图：

图1.PR8-4mut比PR8在Vero细胞上的生长速度快。

图2.高产PR8-4mut骨架能够提高禽流感病毒（H7N1，H9N2）疫苗株在Vero细胞（A和B）和MDCK细胞（C和D）上的生长速度。