发明背景及市场需求

近红外荧光染料在多荧光标记实验中非常有用的，因其较长的荧光波长可以与绿色或橙色荧光很好地区分。活细胞核仁RNA染色对于研究核仁的动态和功能是至关重要的。然而，目前唯一市售的活细胞RNA染料——Invitrogen公司的SYTORNASelect™GreenFluorescentcellStain，不仅染核仁RNA，而且对DNA也有比较明显的染色，不能满足研究者的需求。因此，市场上迫切需要更具特异性的核仁RNA染料，尤其是近红外荧光染料。此外，特异性染线粒体的近红外荧光染料在市场上也比较匮乏。

发明内容

发明人合成了一系列的近红外荧光染料（此处称为X染料），其中一些染料适合于在活细胞中特异性地染色核仁RNA（图1），而另一些染料则特异性地染线粒体（图2）。这些染料具有非常好的光稳定性（图3）。并且，本发明的RNA染料比市售的活细胞RNA染料的特异性更强（图4）。这些染料的荧光发射波长在600～700nm，处于近红外区域。（附图见第2~3页）

竞争优势

1,X染料的荧光波长处于近红外区。

2,良好的光稳定性。

3,适合于活细胞染色。

4,水溶液中稳定。

专利状态

已提交中国专利申请和PCT申请。

中国专利申请号：201210105506;201210186889;201210382198

PCT申请号：PCT/CN2013073600

附图：

图1：X2在活的HeLa细胞中主要染色核仁RNA。

图2：X19在活的HeLa细胞中主要染色线粒体。.

图3：与市售的SYTORNASelectGreen相比，三种X染料（CP1、CP2和CP3），具有良好的光稳定性。（激发波长：488nm，持续激发。500～600nm的持续激发也可以观察到相似的光稳定性。）

图4：X3对核仁RNA染色的特异性比市售的RNAdyeSytoRNAselectGreen更好。上图：活的HeLa细胞分别用X3(左),DAPI(中)orSytoRNAselectGreen(右)染色。中图和下图：HeLa细胞经固定、通透、DNA酶（中图）或RNA酶（下图）消化后，分别用不同染料染色。图3显示SytoRNAselectGreen不仅染核仁RNA，同时也染色DNA，而X3只特异性地染色核仁RNA。